ALH249 热启动Taq PCR Maste

产品简介
热启动Taq PCR Maste是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于科研目的,我公司的热启动Taq PCR Maste品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括热启动Taq PCR MasterMix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:热启动Taq PCR MasterMix
英文名称:2×HotStart Taq PCR MasterMix
产品货号:ALH249
产品规格:0.5ml|5ml
本产品包含HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可zuì大限度的减少人为误差。HotMaster Taq DNA polymerase 采用了上zuì新独特的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此zuì大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的性。本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×HotMaster Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀。
产品组份:HotMaster Taq DNA Polymerase:0.05units/μl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM;稳定剂;增强剂。
储存条件:-20℃。
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| 货号 | 名称 | 规格 |
| YT382 | PCR Master Mix (含蓝色电泳染料) | 400次|2000次|10000次 |
| YT395 | cDNA链合成试剂盒(RNase H-) | 10次 |
| YT399 | 矿物油(石蜡油) | 20ml |
| WE0102 | 2×Taq MasterMix(含染料) | 1ml|5ml|25ml |
| WE0135 | SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料) | 5ml |
| ALH266 | 反转录试剂盒 | 50次|100次 |
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名称:PCR级高GC的DNA清除剂
货号:BTN61203
规格:1.5mL
本产品是我司开发的专门用于富含GC的DNA模板扩增的试剂。
产品特点:
1.,使用效果普遍好于常规的添加DMSO和甜菜碱的方法。
2.可以处理GC含量高达80%的DNA模板。
3. 操作简单,将本产品用于溶解DNA沉淀即可使用。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
将乙醇沉淀的高GC DNA直接溶解在适量的本产品中,充分吹打均匀,然后直接将DNA加入PCR反应体系中进行PCR反应。加入的DNA溶液zuì好不要超过PCR终体积的1/10。剩余的DNA可以长期保存。
名称:BalbMulti多重PCR Mix
货号:WE0117
规格:1ml|5ml
BalbMulti PCR Mix浓度为2×,是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸索即可轻松进行多重 PCR反应。本品中所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。此酶与能提高反应特异性的PCR增强剂以及独特的缓冲体系相配合,使反应体系中所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有助于实现“困难”模板(比如高GC含量的模板)的扩增。BalbMulti PCR Mix适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BalbMulti PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、2~8℃存放三个月,活性无明显改变。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BalbMulti PCR Mix | 25μl | 1× |
| Primer Mix,10μM each | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 适量 | |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物设计时,尽量减小各引物的Tm间的差值,差值尽量控制在5℃以内。各引物浓度请以终浓度0.05-0.2μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性扩增时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10min | |
| 变性 | 95℃ | 30s | 30-40个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 1kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaldStar DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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