BTN100825 自诱导培养基(lac启动子)

产品简介
自诱导(lac启动子)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科学研究,我公司的自诱导培养基(lac启动子)品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括自诱导培养基(lac启动子)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:自诱导培养基(lac启动子)
英文名称:Auto-induction Medium
产品货号:BTN100825
产品规格:200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.大提高外源蛋白的表达量,zuì高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 成分A | 200ml |
| 成分B | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一、培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二、培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底zuì好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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CAS:25389-94-0
分子式:C18H36N4O11·H2SO4
分子量:582.58
储存条件:-20℃。
名称:胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)
货号:YT909
规格:100ml
本品含0.25%胰酶和酚红,不含EDTA。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
注意事项:
1. 在使用胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2. 胰酶细胞消化液(含酚红,不含EDTA)消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
储存条件:4℃,有效期12个月。
名称:DMEM高糖培养基(含L谷氨酰胺,含丙酮酸钠,含HEPES)
货号:SNM557
规格:500ml
名称:分散酶II
货号:SY0513
规格:100mg|1g
Dispase II,中文名分散酶II,一种非特异性金属蛋白酶,细胞生物学中常用于从不同的组织或器官分离单细胞,并用于后续细胞培养,如原代细胞的分离,细胞传代等。另外,Dispase II还可用于消除悬浮细胞培养过程中发生的细胞聚集。与其他细胞生物学常用蛋白酶(如胰蛋白酶、胶原酶、链霉蛋白酶等)相比,该酶具有以下:1)一种快速有效且温和的细胞消化酶,对细胞损伤小,且能维持细胞膜完整性;2)来源于细菌,无支原体或其他动物病毒污染;3)稳定性强,不受温度、pH及血清组分的影响;4)可用于多种类型组织和细胞的分离等。
本品非无菌Dispase II,来源于Bacillus polymyxa,使用时需对其除菌处理,用于细胞培养时常用工作浓度为0.6-2.4U/ml。
比活性:≥0.8U/mg (+37℃, casein as substrate, pH 7.5)
单位定义:在温度37℃、pH值为7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白释放出相当于1µM(181µg)酪氨酸的福林阳性氨基酸和肽所需要的酶量,即为一个蛋白酶活性单位,以U表示。
zuì佳pH:6.0-8.5
抑制剂:EDTA, EGTA, Hg2+, 其他金属离子。血清不会抑制dispase活性。
激活剂(Activator):Ca2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+,Al3+。zuì佳的Ca2+浓度为2mM。本酶制品已含足量的Ca2+使其处于zuì佳活性。
储存条件:4℃
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