ALH329 TA克隆试剂盒

TA克隆试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多TA克隆试剂盒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TA克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
英文名称：Zero Background TOPO TA Cloning Kit(with MCS)
产品货号：ALH329
产品规格：20次|80次

本试剂盒采用了拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、（接近）连接DNA片段的原理，这与和传统的T4连接酶原理不同。

试剂盒组份(20次)：
TOPO-Ta Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control（30ng/μl）————5μl
10×Enhancer———————————20μl

产品特点：
1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。
2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近）。
4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前上zuì简单、zuì快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

本制品别名：TA载体连接试剂盒

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货号	名称	规格
BTN130803	pression/BTN130803.html" target="_blank">单细胞裂解液(DNA提取)	1mL
BTN90407B	pression/BTN90407B.html" target="_blank">λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)	5μg
BTN150801	pression/BTN150801.html" target="_blank">大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞	10*100μL
BTN51101	pression/BTN51101.html" target="_blank">常态大肠杆菌细胞转化液(免感受态细胞制备)	20次
BTN120699	pression/BTN120699.html" target="_blank">多粘菌素B硫酸盐	5mL
BTN60208	pression/BTN60208.html" target="_blank">硫酸卡那霉素溶液	10mL

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名称：DNA去磷酸化试剂盒
货号：BTN130828
规格：20次
分子克隆时，载体的自连大降低了连接效率，而对载体DNA 两个5′端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5′端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。

产品特点：
1.基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。
2. 把DNA和RNA 5′端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。
3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。
4.处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。

试剂盒组成

成分	规格
10×去磷酸缓冲液	100μl
细菌碱性磷酸酶(0.5U/μL)	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。

使用方法：
注意：dNTP和ATP 也是碱性磷酸酶的底物，所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP，一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶，降低DNA 去磷酸化效率。

1、在微量离心管中配制下列反应液(50μL)：

成分	用量
DNA片段	不超过10pmol
10×去磷酸缓冲液	5μl
细菌碱性磷酸酶	2.5μl
超纯水到	50μl

2、65℃反应30分钟。如果是RNA样品，建议在37℃反应30分钟。
3、酚氯fǎng抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA 待用(见附)。

附：酚/氯fǎng抽提DNA、乙醇沉淀浓缩DNA(本试剂盒不提供相关试剂，需要从本公司另购相关试剂，下列操作仅供参考)：
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超纯水增加体积，以免纯化过程中DNA 丢失。如果有必须，可以加入和4μL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入100μL 酚/氯fǎng/异戊醇25：24：1 混合液震荡半分钟混匀，室温12000g离心3分钟，转移上清到新离心管中。
3、重复上步操作一次。
4、加0.1倍体积(即10μL)的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍体积(即250μL)的无水乙醇。
6、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
7、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
8、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
9、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。

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本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8517617.html
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