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SV1382 T4 RNA 连接酶 2,截短型

  • 产品/服务:SV1382 T4 RNA 连接酶 2,截短型
  • 型 号:SV1382
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-06-29
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:989
产品简介

T4 RNA 连接酶 2,截短型由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的,我公司的T4 RNA 连接酶 2,截短型品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q
产品货号:SV1382
产品规格:10KU|2KU

特性:
将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上,用于链特异性 cDNA 文库构建
概述:
T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQ(T4 Rnl2tr KQ)能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到 RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP,但需预腺苷化接头。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2,截短型(M0242)的双点突变体。K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性,K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接(串联体和环)。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K,提高了酶的连接活性,使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
连接反应的背景被降为zuì低是因为:不再使用 ATP,而改用预腺苷化接头,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶已用于二代测序 small RNA 的文库构建中,优化了接头的连接过程。
来源:
重组 E. coli 菌株,携带有 MBP 融合表达的质粒,该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前 249 个氨基酸编码。T4 Rnl2tr K227Q 将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 227 位置进行了突变,精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
反应条件:
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
质保声明:
无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义:
200 单位指 10 μl 反应体系中,25℃ 条件下,1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头(S1315)] 所需的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
200,000 units/ml。

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