HR8323 伊红染色液

产品简介
北京百奥莱博供应的伊红染色液用于科研试验,伊红染色液是我司众多优质细胞组织染色之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括伊红染色液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:伊红染色液
产品货号:HR8323
产品规格:100ml
伊红染色液是采用优质试剂原料和经典配方配制,用于组织切片或培养细胞的染色。伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。本染色液可以重复使用,直至效果不佳时再换用新的染色液。
储存条件:室温密封保存。
有效期:一年。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如需脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
● 移液器及吸头 ● 显微镜
使用方法:
使用注意事项:
● 次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
● 若染色较浅,可延长染色时间或重复染色一次。
● 若染色较深,可延长水洗时间或再重复梯度脱水一次。
1.样品处理
石蜡切片:
二甲苯中脱蜡10-15分钟。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡10-15分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟。
30%乙醇2分钟。
蒸馏水2分钟。
冰冻切片:
回温后的切片蒸馏水30秒-1分钟。
培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2.伊红染色
上述处理好的样品:
用蒸馏水浸润组织1-2分钟,确保蒸馏水覆盖整个组织,使水分均匀分布。
伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
70%乙醇洗涤2次后即可直接观察或者继续按后续步骤进行脱水、透明、封片。
脱水,透明,封片后镜检。
如果用于免疫组化等染色后的复染,可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。
显微镜下观察,细胞浆呈红色。
3.脱水、透明、封片或进行其它染色
脱水、透明、封片:
95%乙醇脱水2分钟。
换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。
二甲苯透明 5分钟。
换用新鲜的二甲苯,再透明 5分钟。
用中性树胶或其它封片剂封片。
其它染色:
如果进行免疫荧光染色,或进行 Hoechst等荧光染料的染色,在伊红染色液染色后:
70%乙醇洗涤2次,每次2分钟。
PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。
然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
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钙黄绿素AM,是一种应用广泛的绿色荧光细胞标记物。钙黄绿素AM具有膜透性,共孵育时可以传过细胞,其本身不具有荧光信号,但在胞内被酯酶水解后,生成具有荧光信号的钙黄绿素。
在健康的活细胞细胞质中,钙黄绿素可以保持高负电荷状态。由于其对细胞的毒性小,钙黄绿素AM 已经被广泛用于研究细胞膜的完整性和长期示踪观察以及活细胞计数。
CAS:148504-34-1
分子式:C46H46N2O23
分子量:994.86
储存:-20℃,避光,有效期12个月
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规格:100T
吖啶橙(Acridine Orange,AO)为一种荧光染料,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm,吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光,红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 请注意避光。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
使用注意事项:
●本染色液用于细胞染色分析,也可用于细胞涂片的检测。以下以培养细胞的荧光显微镜检测为例,
细胞染色可用预冷的70%的乙醇固定,4℃,1-2小时,也可不固定,其他方法请参阅相关资料。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●染色后请尽快检测。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
● AO有毒,操作时要戴上手套。
1.收集细胞,PBS洗涤细胞一次,2000rpm离心5分钟,用PBS重悬细胞,调整细胞浓度约为106个/ml;
2.取100μl细胞悬液,加入5μl吖啶橙染液,轻轻混匀;
3.混匀后4℃避光放置10-15min后,滴加于载玻片上,加盖玻片;
4.荧光显微镜检测。
5.荧光显微镜检测结果。zuì大激发波长为488nm。
结果分析:
在荧光显微镜下,选用488nm激发光镜检:AO染色正常细胞DNA呈均匀黄色或黄绿色。当细胞凋亡时,染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒或黄绿色碎片。
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