YT060 高灵敏ECL化学发光试剂盒

高灵敏ECL化学发光试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品仅用于生物化学研究方面，我公司专注于免疫检测产品的研发、生产和供应，为您提供的高灵敏ECL化学发光试剂盒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括高灵敏ECL化学发光试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：高灵敏ECL化学发光试剂盒
英文名称：High sensitive ECL chemiluminescence kit
产品货号：YT060
产品规格：共100ml

本Western萤光检测试剂是一种超敏ECL化学发光试剂盒，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。

本试剂盒灵敏度高，比DAB显色的灵敏度至少高200倍，是进口品牌同类产品的几倍甚至几十上百倍。

本试剂系统发光时间长。在100微升1微克/毫升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升本试剂盒的工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液进行检测。在暗房中，两者均可发出肉眼可见的蓝色萤光，但加入本试剂盒工作液的试管内的亮度明显高很多。zuì初数分钟内加入本试剂盒工作液的试管发光强度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管的3倍。约30分钟后，加入本试剂盒工作液的试管仍然可以发出肉眼可见的较强的蓝色萤光，而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管发出的萤光已经很难用肉眼进行分辨，定量结果显示此时加入本试剂盒工作液的试管发光强度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管的100倍以上。

本试剂盒的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。

本试剂盒采用全新配方，更加稳定。本试剂盒的两种试剂37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。

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货号	名称	规格
YT061	超灵敏ECL化学发光试剂盒	共100ml
YT093	Kisser封片液(不含苯酚)	10ml
ZN1874	微量BCA蛋白质定量试剂盒	1盒
ZN1906	BSA PBS缓冲系统封闭液(干粉)	1包
ZN1909	BSA TBS缓冲系统封闭液(干粉)	1包
ZN1947	防脱片玻片(APES和多聚赖氨酸双重处理)	50片
ZN1867	超灵敏抗山羊IgG免疫组化试剂盒	3ml|6ml|12ml|50ml|100ml

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名称：SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液2×(变性)
货号：ZN1875
规格：1ml×6
产品保存：-20℃保存，一年有效
产品说明：SDS-PAGE Tricine 蛋白上样缓冲液 2×,是一种以考马斯亮蓝 G-250 为染料的2倍浓液的蛋白上样缓冲液，试剂中含有 SDS，甘油，考马斯亮蓝 G-250，Tris-HCL缓冲液等，可用于常规的多肽和小蛋白的SDS－PAGE 变性蛋白样品上样。
使用方法：
1.按照1体积蛋白样品加入1体积蛋白上样缓冲液即1：1的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2×)。经 100℃水浴变性3-5分钟后即可上样，电泳。
2.通常电泳到当考马斯亮蓝G-250染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
注意事项：
1．刚从冷冻保存中拿出来平衡至室温溶解后，可能会出现 SDS的沉淀，建议可用温水水浴中使其溶解。
2．为了您的安全和健康，请戴一次性手套在通风厨内操作。

名称：彩色预染超高分子量蛋白质标准(10-20次)
货号：ZN1883
规格：100μl
产品保存：-20℃保存，一年有效。
产品特点：
锐利且稳定的颜色。
多种颜色 – 易于凝胶中示踪。
即用型上样 – 无需煮沸。
免疫印迹转膜效果好。
产品应用：
监控 SDS-PAGE 凝胶中的蛋白迁移。
检验免疫印迹转膜效率。
SDS-PAGE 凝胶和免疫印迹杂交膜上蛋白大小的粗略鉴定。
未染色预制胶中待切割目标蛋白的定位。
产品说明：
彩色预染超高分子蛋白质 marker 特异性用于大分子蛋白分析。其含有 8 种重组的高纯度蛋白，表观分子量范围43-315kDa。这些蛋白采用3种不同的染料分别染色。彩色预染超高分子蛋白质marker是即用型产品，使用前无需加热、稀释或变性剂处理。
使用方法：
1.室温或37℃融化 Ladder 几分钟，确保试管中的固体完全溶解，不要煮沸。
2.轻轻混匀，确保溶液完全混匀。
3.上样：
小凝胶：5μl/泳道，凝胶厚度 0.75-1 mm。
大凝胶：10μl/泳道，凝胶厚度 1-1.5 mm。

名称：ECM Kit(兔IgG)
货号：ZN1926
规格：1盒
用途：适于一抗为兔IgG的Western Blotting 检测。
保存条件：4℃可保存一年 。
Western Blotting 检测试剂盒内容：
1.封闭试剂：10g 蛋白质干粉(脱脂奶粉)。
2.HRP 标记羊抗兔IgG：0.1ml 亲和纯化抗体，经过人血清吸附以去除交叉抗体。
效价 1：2000-10000。
3.ECM 显色剂：总量 10ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每个试剂盒足够 10 张小膜或800 c ㎡面积的膜显色。
工作原理：
蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下 ,向着与其电荷相反的电移动的现象。根据所采用的支持物不同,可分为：琼脂糖凝胶电泳、淀粉凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。其中以聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)zuì广泛。它的优点为：无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出 10-9-10-12mol的样品,
凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶。SDS-PAGE 是zuì常用的定性分析蛋白质的电泳方式,它根据蛋白分子大小不同，迁移速率的不同而达到分离目的，特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。
免疫印迹是将凝胶电泳的高分辨力和免疫化学检测的特异性融为一体。免疫印迹技术先借助凝胶电泳将蛋白质抗原分离，然后将凝胶中的蛋白质转印到膜上使之成为被分离的一个拷贝。免疫印迹为检测样品中是否存在目的蛋白提供一种可靠的方法，该法鉴定蛋白质的原理是根据被测蛋白能与特异性抗体结合的特性并通过相对迁移率来体现该蛋白的分子量。
如果想要了解样品中是否存在某一抗原，以及该抗原的含量或该抗原多肽链的相对分子质量以及亚型，是否与其他蛋白结合，蛋白质的酪氨酸残基是否发生磷酸化等有关问题均可采用免疫印迹。
免疫印迹包括多个简单步骤，可在一到两天完成，该方法具有，简便，灵敏等特点。
实验操作步骤：
1．蛋白质的样品制备：
1)细胞培养蛋白质样品的制备：
1：胰酶消化后裂解：细胞培养至 80%左右密度时，以含 0.25%胰蛋白酶消化,室温，低速离心，弃上清。细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)反复吹打。
2：皿上直接裂解：细胞培养至 80%左右密度时，细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)，用细胞刮刀收集，转移至离心管中，反复吹打。
2)组织样品的制备：新鲜组织块迅速置于预冷的生理盐水中，漂洗数次，按组织净重：裂解液=1：10的比例，加入相应体积的裂解液进行匀浆，离心收集上清(如有粘稠物可超声处理)
3)蛋白变性：处理后的样品加入样品缓冲液(按样品浓度 1：1或1：2的比例)混匀，样品置 1000C的水浴箱加热 3-5分钟，10000g 离心 10分钟，取上清液。(样品可立即使用也可以分装冻存，-20℃可稳定保持数月。)
2．SDS-PAGE 电泳：
1)．制 胶：①按比例配制分离胶(丙烯酰胺母液：单体：双体=29：1)，缓缓地摇动溶液，使激活剂混合均匀，将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃中，再在液面上小心注入一层水或正丁醇，以阻止氧气进入凝胶溶液中，37℃恒温箱中静置 60min。
②同前按比例配制浓缩胶，但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多的氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分，以连续平稳的液流注入凝胶溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡，37℃恒温箱中静置60min 以上以保证完全聚合。
2)加 样：依次加入标准品和待分析样品。(加样时间要尽量短，以免样品扩散，可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。样品一般在 1.0mm 厚6、显色(ECM)ECM 显色剂配制:按 1ml 蒸馏水，加显色剂 A、B 各 1 滴混匀。将杂交后印迹膜放入显色盒中,加上混合好的显色液反应约 1-5分钟。吸去印迹膜边缘显色液,将一透明的玻璃纸盖住抚平,以确保×感光胶片的干燥。印迹膜转入暗室中使胶片曝光 30＇-5分钟。
7、显影，定影。 将曝光后的×感光胶片放入显影液中冲洗至胶片上出现条带或者胶片透明为止,再放入定影液中定影，胶片可长期保存。

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