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产品详情

BTN71202 血液RNA柱式提取试剂盒

  • 产品/服务:BTN71202 血液RNA柱式提取试剂盒
  • 型 号:BTN71202
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-06-29
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:998
产品简介

血液RNA柱式提取试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,仅用于生物化学研究方面,我公司的血液RNA柱式提取试剂盒品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括血液RNA柱式提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:血液RNA柱式提取试剂盒
英文名称:Blood RNA column Extraction Kit
产品货号:BTN71202
产品规格:50次

本试剂盒是在血液RNA提取试剂盒(BTN3071)基础上开发的柱式升级产品,专门从动物全血样品中快速提取总RNA。

试剂盒特点:
1. 比BTN3071更加简单快捷,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十分钟左右,可以全在室温下进行。
2.产量和纯度更高,OD260/280 均在2.0左右,产率一般为2-5μg/mL人血。
3. 每次微量提取的zuì大样品处理量可以达到1.5mL,高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸钠,草酸钠)兼容,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

试剂盒组成:
成分 50T
溶液A 50ml
溶液B 15ml
溶液C 50ml
离心吸附柱 50套
通用洗柱液 50ml
RNA洗脱液 10ml
说明书 1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 12000~15000g室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。
3. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将0.3mL的溶液B加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
5.和0.2mL lǜ仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
6. 12000~15000g室温离心3~5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过0.7mL,否则下一步不能加入等体积的溶液C。为防止污染,zuì好留100μL左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
7. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
8. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 如果有必要,可以再加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。注意:增加此步可以进一步提高RNA的纯度。
11.室温12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一个RNase-free的收集管中,加入50-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
13. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答:
Q:如何去除RNA样品中的DNA污染?
A:可以使用百奥莱博的非酶DNA 清除剂DNA ERASOL-2。
Q:为何有的样品在第6 步离心后有很厚的中间层,上清很少。
A:这是因为蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
Q:离心吸附柱的RNA zuì大吸附量是多少?
A:是40μg。


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