HR8043 植物内质网蛋白提取试剂盒

植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，仅用于生物化学研究方面，我公司的植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)
英文名称：Plant endoplasmic reticulum protein extraction kit non enzymatic method
产品货号：HR8043
产品规格：50T|100T

植物内质网蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取内质网蛋白。提取过程简单方便，制备的内质网蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解植物内质网组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我公司其他货号的试剂盒。也可以将zuì后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理。
本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，而且少交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法较低。酶法提取制备的蛋白，回收率稍有提高，蛋白纯度高，保持天然活性，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。
我公司可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒，专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。我公司还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。提取液A长期不用请置-20℃保存。
【注】：
●蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
●蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得zuì佳实验效果。
2．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5．zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6．实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
● 使用方便。
●含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
● 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
●蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●离心机● 振荡器● 涡旋混匀器● 匀浆机/Dounce匀浆器● 移液器●冰箱●冰盒
试剂：
● PBS(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1×))phosphate buffer saline/Dμlbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材：
●离心管● 吸头● 100um细胞筛

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：
每300μl提取液C中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200-500mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎，加入1ml 提取液A 后用匀浆机充分匀浆或者用Dounce 匀浆器充分匀浆。
【注】：
● 匀浆尽可能充分。至无明显可见固体。
●培养细胞直接收集细胞后用Dounce匀浆器匀浆即可，匀浆后加提取液A混匀后直接进行以下步骤离心。
● 处理叶片等组织样本如果没有匀浆机，也可先加少量提取液A 后用Dounce 匀浆器充分匀浆后再加提取液A 混匀。
3．将匀浆用100μm细胞筛过滤。
【注】：
● 液体量少时可以加入1-2ml PBS 混匀后再用细胞筛过滤。
● 没有细胞筛时可以不过滤，将匀浆液在4℃静置1分钟，待大的粗纤维，成团组织块等没有破碎的组织块自然沉降，吸取上清。或者以低于100g 力条件下离心1分钟，收集细胞上清，弃组织沉淀。
● 部分黏液较多的植物样本可能难以吸取，可以将1ml 吸头的口剪掉一点再吸。
4．将滤液在200g条件下离心3分钟，弃沉淀，收集上清。
5.在500g条件下离心5分钟，弃沉淀，收集上清。
6．在1000g条件下离心10分钟，弃沉淀，收集上清。
7．将上清20000g 力离心10分钟。弃沉淀，取上清。
8．将上清30000-50000g离心45分钟。弃上清，留沉淀。
【注】：
● 如果条件允许，可将离心力加大到100000g，有利于回收光面内质网小泡。
9.在沉淀中加入400μl冷的试剂B，充分混匀。
10.在4℃，30000g-50000g 力条件下离心45分钟。
【注】：
● 如果条件允许，可将离心力加大到100000g，有利于回收光面内质网小泡。
11.在沉淀中加入200-300μl提取液C，充分混匀。
12．置振荡器2-8℃振荡30分钟。
【注】：
●用振荡器/摇床的较低转速，保持液体有轻微晃动即可。
● 没有低温振荡条件可以不振荡，在2-8℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
13.在4℃，14000g条件下离心15分钟。
14．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到核蛋白。
15．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】：
● 建议用BCA 法进行蛋白定量。相关产品：HR0329。
●蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
常见问题分析：
●蛋白浓度低？
植物核蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，尽可能增加样本量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂A的匀浆次数，并适当延长试剂A和B的处理时间即可。zuì好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

根据您的关注的植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)，植物内质网蛋白提取试剂盒，植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)，非酶法，HR8043，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：



名称：包涵体蛋白溶解及复性套装
货号：BTN100302
规格：100次
本产品用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体，其中的重组蛋白质只完成部分折叠，还没形成zuì后的正确空间结构，所以没有生物活性，要得到有活性的重组蛋白，还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前zuì常用的溶解包涵体的方法是用尿素，Sarkosyl，盐酸胍等强变性剂，其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性，使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计。

产品特点：
1.一站式，提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体，释放的包涵体蛋白质不彻底变性，还能保持其部分折叠的结构，使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性，经过精心优化，有利于大部分蛋白的复性。
4.还提供五种不同的添加剂，它们可以单独加入复性液，也可以按一定比例进行自由组合，以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格，用于做预实验用，用户如果选择到合适的溶液组合后，可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1mL规模)的蛋白质复性实验。

试剂盒组成：

成分	规格
包涵体洗涤液	250mL
包涵体温和溶解液(10种各一套)	10×10ml
包涵体蛋白质复性液	250ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水、BCA蛋白浓度测定试剂盒、0.22μm注射器式滤膜。

使用方法：

一、洗涤包涵体
 说明：用常规方法得到的包涵体常常含有去污剂和细胞碎片，因此需要经过充分的洗涤才能用于本实验。
1．将10mg包涵体沉淀溶解在5mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。可以适当留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
2．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
3．重复上面的洗涤步骤3次，每次留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
4．将包涵体沉淀溶解在1mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。
5．检查包涵体的纯度：将上步得到的包涵体溶液和前几步得到的预留样品一起用于SDS-PAGE电泳，检查每次洗涤去除杂带的情况。
6．检查包涵体的浓度：用自备的BCA蛋白检测试剂盒测试第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度。
7．将第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度调到5-10mg/mL(如果低于此范围，则离心后用适量的洗涤液再溶解；如果高于此范围，则用洗涤液稀释)，然后均分到10个1.5mL塑料离心管中，每管100μl。
8．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
9．所得沉淀即纯化的待用的包涵体。

二、确定溶解包涵体的zuì佳条件
1．标记上步得到的10个离心管，并分别加入10种包涵体温和溶解液，每种1mL。注意：准确记录它们的对应关系。
2．充分振荡后，室温放置30分钟。
3．450nm检测浑浊度并记录下数据。
4．4℃ 12000rpm离心10分钟后收集上清，此即包涵体溶解液。
5．用0.22μm注射器式滤膜过滤包涵体溶解液。
6．280nm检测包涵体溶解液的光吸收。
7．溶解液溶解包涵体能力跟包涵体溶液浊度跟成反比，跟包涵体溶解液中OD280数值成正比。根据上面的数据即可确定哪种溶解液对实验中所用包涵体具有zuì佳溶解能力，并将在此溶解液中溶解的包涵体溶解液用于下面的复性实验。大量处理需要从本公司单独大量订购包涵体温和型溶解液10种中的1种。

三、包涵体蛋白的复性
1．在2.5mL 4℃预冷的、处于轻柔搅拌中的复性缓冲液中，逐滴加入上步得到的包涵体溶解液。
2．待所有包涵体溶解液都加完后，将包涵体蛋白复性溶液用孔径为0.22μm注射器式滤膜过滤，除去包涵体(直径一般在0.5-0.8μm)和大的聚合物。
3．将得到的溶液用于活性检测或离子交换柱层析和分子筛层析。

关注植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)，植物内质网蛋白提取试剂盒，植物内质网蛋白提取试剂盒(非酶法)，非酶法，HR8043，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

货号	名称	规格
YT035	蛋白标准(5mg/ml BSA)	1ml
YT951	细胞冻存液	50ml
SNM379	Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒	50块胶
SNM410	Bradford法蛋白检测试剂盒	100T/96样
SNM491	PBS缓冲液	500ml
KFS038	kFluor350标记抗兔免疫荧光染色试剂盒	300T
SY0301	BSA标准品(2mg/ml)	10ml|50ml

如果您觉得“HR8043 植物内质网蛋白提取试剂盒”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8513084.html
已经有912位访客查看了本页.