MQ0068 NMY51酵母感受态细胞

北京百奥莱博供应的NMY51酵母感受态细胞用于科研目的，我公司的NMY51酵母感受态细胞品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括NMY51酵母感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：NMY51酵母感受态细胞
英文名称：NMY51 Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0068
产品规格：10×100μl/50×100μl

DUALmembrane系统是专门筛选跨膜蛋白间相互作用的检测技术，它利用分离的泛素系统(split-ubiquitin)直接检测天然状态下膜蛋白间的相互作用，是目前市面上检测膜蛋白间相互作用的酵母双杂系统。
此系统采用NMY51酵母菌株，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；此菌株Transformation marker为：trp1，leu2-3，报告基因为：HIS3，ADE2和lacZ，步通过营养缺陷型报告基因(HIS3，ADE2)进行选择性生长筛选，进一步通过LacZ报告基因进行β-半乳糖分析显色的定量或半定量筛选，三个的报告基因，受不同启动子的调控，降低假阳性几率。
原理：泛素(ubiquitin)分子量很小，由76aa 残基组成；泛素作为降解信号分子，可以连接另外一种蛋白质的N端，然后被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。
泛素可以人为分成两部分：N端(Nub)，C端(Cub)。先，人为地将泛素Nub的3位异亮氨酸突变为甘氨酸(NubI突变为NubG)。这样与Cub的亲合力大大降低，避免了Cub和Nub自我结合或接近的可能性。其次，将Cub部分与人工合成的LexA-VP16转录激活因子融合成一个融合蛋白Cub-LexA-VP16。
正常条件下NubG不与Cub结合，UBPs也不能识别分离的泛素，转录激活因子也不会被切下来。zuì后，将要检测的蛋白质分别与NubG和Cub融合，形成bait融合蛋(bait-cub-LexA-VP16)和prey融合蛋白(prey-NubG)。
如果bait和prey发生相互作用，就会促使NubG和Cub的相互接近，被 UBPs识别，导致LexA-VP16的解离，进入核内，从而激活报告基因的转录。
此系统可使用四种Bait质粒：pBT3-N，pBT3-SUC，pBT3-STE，pBT3-C，筛选标志均为LEU；三种Prey质粒：pPR3-C，pPR3-SUC，pPR3-STE，筛选标志均为TRP。NMY51感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，经PGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。
保存条件：-80℃
基因型：
MATahis3200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZade2::(lexAop)8-ADE2 GAL4
操作说明：
1.取100 μl冰上融化的NMY51感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5μg，Carrier DNA(95-100度5min 快速冰浴，重复一次)10 μl，PEG/liAC 500μl并吸打几次混匀，30度水浴30分钟(15 min时翻转6-8次混匀)。
2.将管放42度水浴15min(7.5 min时翻转6-8次混匀)。
3.5000 rpm离心40s弃上清，ddH2O 400μl重悬，离心30s弃上清。
4.ddH2O 50μl重悬，涂板,29℃培养48-80h。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.转化高浓度的质粒可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
3.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
4.NMY51酵母菌株对高温敏感，zuì适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
5.酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。

根据您的关注的NMY51酵母感受态细胞，NMY51酵母感受态细胞，MQ0068，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：


BTN130204 pression/BTN130204.html" target="_blank">Oligo快速复性液 1mL
BTN130562 pression/BTN130562.html" target="_blank">大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞 0.1mL*10
BTN120682 pression/BTN120682.html" target="_blank">杆菌肽溶液 1mL
YT448 pression/YT448.html" target="_blank">GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件) 1μg
YT481 pression/YT481.html" target="_blank">N端His标签融合蛋白质粒 1μg
ALH337 pression/ALH337.html" target="_blank">通用载体连接试剂盒 20次
MQ0019 pression/MQ0019.html" target="_blank">BJ5183化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0040 pression/MQ0040.html" target="_blank">BL21 Star(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl

关注NMY51酵母感受态细胞，NMY51酵母感受态细胞，MQ0068，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

货号	名称	规格
BTN130828	pression/BTN130828.html" target="_blank">DNA去磷酸化试剂盒	20次
BTN140378	pression/BTN140378.html" target="_blank">大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞	10*100μl
BTN80910	pression/BTN80910.html" target="_blank">X-gal溶液	10mL
BTN120699	pression/BTN120699.html" target="_blank">多粘菌素B硫酸盐	5mL
BTN120685	pression/BTN120685.html" target="_blank">先锋霉素溶液	1mL
BTN120695	pression/BTN120695.html" target="_blank">新生霉素溶液	5mL
YT448	pression/YT448.html" target="_blank">GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件)	1μg

如果您觉得“MQ0068 NMY51酵母感受态细胞”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8513079.html
已经有982位访客查看了本页.