HR0386 蛋白浓缩试剂盒

蛋白浓缩试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，仅用于生物化学研究方面，我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应，为您提供的蛋白浓缩试剂盒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括蛋白浓缩试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：蛋白浓缩试剂盒
产品货号：HR0386
产品规格：50T

蛋白浓缩试剂盒适用于将稀释的蛋白样品定量浓缩成小容量。浓缩过程简单方便，可在1小时内完成。浓缩的蛋白样品可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
浓缩方法涉及到应用试剂混合蛋白溶液，定量沉淀蛋白。沉淀后，沉淀被洗去盐和其它试剂，蛋白沉淀被悬浮在一小容量的缓冲液。本试剂盒可用于沉淀蛋白、浓缩蛋白、去除各种缓冲液杂质组分、改换缓冲液体系。适用于多种蛋白质组研究下游应用。

储存条件：试剂C和D 2-8℃保存；试剂A和B室温保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器
●冰箱，冰盒 ●蛋白Loading Buffer
使用注意事项：
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

使用方法：
1．取5ml离心管，加入500μl 待浓缩液体样本，加入2ml试剂A，500μl试剂B，1.5ml试剂C，涡旋20秒充分混匀。
2.冰浴或4℃冰箱放置30分钟。
3.在4℃，11000rpm条件下离心15分钟。
4.小心吸取zuì上层和zuì下层丢弃，收集中间蛋白层。
5.在4℃，12000rpm以上条件下离心15分钟。
6．弃上清，收集沉淀。
7．加入20－50μl 1×蛋白Loading buffer，煮10nim。或者用20－50μl试剂D溶解蛋白沉淀。
8.在4℃，11000rpm条件下离心10分钟。
9．收集上清直接用于下游实验。

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货号	名称	规格
BTN90402	蛋白胶微量回收试剂盒	50次
SNM503	即用型SABC-POD免疫组化试剂盒(适用人/大鼠/小鼠/山羊/兔中一种)	160张片
RFT065	30％丙稀酰胺溶液(29:1)	100ml
KFS031	即用型免疫组织化学SP试剂盒(Mouse)	300 片
KFS227	ICAD蛋白检测试剂盒	50T
JN0190	温和RIPA裂解试剂	100ml|500ml
QN1223	SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色)	100T-200T

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名称：动物细胞裂解液A(非变性)
货号：BTN80807A
规格：100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能zuì大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，zuì好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索zuì佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(zuì佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，zuì好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
7. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，zuì好新鲜使用。
6. 使用前zuì好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

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